三、合成多肽药物药学研究的主要内容

合成多肽药物的药学研究内容和一般化学药物一样，主要包括原料药的制备工艺研究和结构确证研究、制剂的处方工艺研究、质量研究和质量标准的制订、稳定性研究等。这些研究内容的一般性的技术要求也和一般化学药物基本一致。但是，正如前面所讨论的，多肽药物还有一些特殊的方面需要在研究中予以考虑，以下主要是针对多肽药物药学研究的特殊内容及其技术要求进行讨论，这些技术要求也包括了对申报资料内容的一些要求。

（一）原料药制备工艺研究

1、工艺选择

研究者可以根据目标肽的结构、自身生产条件等考虑选用液相合成或固相合成工艺。但无论采用何种合成工艺，均需要提供化学反应式、工艺流程图、操作过程等，对工艺参数（如投料量、反应条件、反应试剂）要有详细的描述，包括对于多肽的修饰（例如二硫键的形成等）。

2、起始原料、试剂的质量控制

（1） 氨基酸及其衍生物

氨基酸及其衍生物作为多肽合成的起始原料，其质量对合成多肽的质量有重要影响，因此应关注氨基酸及其衍生物的来源、质控方法等。对于起始原料的质量控制应足以保证其质量的一致性，以最终保证合成的多肽批间质量的稳定。作为起始原料的氨基酸及其衍生物的质量标准一般应包括性状、熔点、比旋度、化学纯度、色谱纯度及光学纯度、含量等，其中对于起始原料的化学纯度和光学纯度的控制尤为重要。

如果使用了特殊的氨基酸或其衍生物，例如经过复杂修饰的非天然氨基酸、采用新工艺合成的氨基酸等，申报资料中还应提供其合成工艺及结构研究的相关资料。

（2） 树脂

采用固相合成方法制备多肽，应提供树脂的来源、质量标准和检验报告，并对树脂的摩尔取代系数、在不同溶剂中的膨胀系数、所用合成条件下的稳定性情况、交联度等予以说明。

常用树脂包括聚苯乙烯-苯二乙烯交联树脂、聚丙烯酰胺和聚乙烯-乙二醇类树脂及衍生物等，应根据目标多肽C末端氨基酸的不同类型（如羧酸型、酰胺型等）选择特定用途的树脂，并说明选择的依据。

（3） 试剂和溶剂

可以参考《化学药物原料药制备和结构确证研究技术指导原则》的基本要求。

3、工艺的过程控制

（1）反应终点监控

液相合成属于常规有机合成，一般可采用色谱法(如TLC法、HPLC法)监测；固相合成偶合反应的终点可采用茚三酮法、三硝基苯磺酸（TNBS）法和四氯苯醌等监测。二硫键连接的终点可用Ellman试验或HPLC法监测。除上述方法外，其他合适的方法也可以使用。

（2）中间体质量控制

对于液相合成，应参照《化学药物原料药制备和结构确证研究的技术指导原则》对中间体的质量进行控制，特别要对缩合片段制订合适的质量标准（例如对比旋度、熔点和纯度等进行控制），含有较长序列的中间体还应进行结构研究（例如氨基酸组成分析、氨基酸序列分析、质谱、比旋度等）。

对于固相合成，一般无中间体分离过程。但如果多肽从树脂上切割后还需进行后续反应，对中间体的质量也要进行相应控制，同时还要进行相应的结构研究。

4、分离和纯化

在多肽合成过程中，会产生一些与目标多肽结构和性质类似的杂肽，例如缺失肽、非对映异构体等，随着肽链的增长，可能存在的杂肽数量也随之增加。因此，应研究合适的纯化方法将目标肽从杂肽中分离出来。

多肽纯化方法的选择需要综合考虑多肽和杂肽的肽链长短、极性和荷电性、粗品的纯度等。可用于多肽纯化的方法包括重结晶、逆流分布、电泳、离子交换色谱、凝胶过滤色谱、反相色谱等。目前已上市多肽药物常见的纯化方法是采用凝胶柱脱盐后，再用制备型高效液相色谱进行纯化。

对于选定的纯化方法，应提供详细的验证性资料例如纯化前后样品的代表性色谱图以说明纯化效果。同时应提供详细的纯化过程和相关的工艺参数。纯化工艺的研究可结合质量研究中杂质分析方法的验证进行。

纯化后样品的干燥方法也应明确。常用的干燥方法为冻干法，如果多肽对温度不敏感，也可采用室温或高温干燥。

目     录

一、前言

二、合成多肽药物药学研究的基本考虑

三、合成多肽药物药学研究的主要内容

（一）制备工艺研究

（二）结构确证研究

（三）制剂处方工艺研究

（四）质量研究与质量标准

（五）稳定性研究

四、名词解释

五、参考文献

六、著者